疑似病毒性肺炎住院患者xTAG呼吸道病毒

本文原载于中华医学杂志年34期-页（节选）

对于病毒性肺炎，传统实验室诊断方法敏感性较低。近年来，PCR技术使呼吸道病毒感染的检测敏感性明显提高，尤其有利于成年人病毒性肺炎的病因诊断。xTAG呼吸道病毒多重检测技术(xTAGRVP)是将多重逆转录PCR与微球杂交融合在一起的液相悬浮芯片检测系统，具有特异性高、高通量、高敏感、重复性好、检测血清用量少等优点。本研究利用xTAGRVP技术对疑似病毒性肺炎住院患者的病原学情况进行检测，报道如下。

一、对象与方法

1．对象：

选取年1月至年12医院急诊科，内科重症监护室(MICU)和呼吸科疑似病毒型肺炎住院患者例，其中男77例，女56例，年龄17～88岁，平均(54.09±19.15)岁。患者均有胸部X线片或CT提示肺部磨玻璃样改变，进行痰或支气管肺泡灌洗液细菌培养和真菌培养后均未发现致病菌，进行肺炎支原体和肺炎衣原体的抗体检测结果为阴性。所有患者使用抗生素后肺部感染症状没有缓解。

2．标本采集：

采集患者的痰液或支气管肺泡灌洗液，采集的标本均置于3ml病毒保存液中于4℃保存。所有标本在采集后48h内进行检测。

3．核酸提取：

每份样本吸取μl转至1.5ml无RNA酶Eppendorf管中，加入大肠埃希菌噬菌体MS2RVP20μl作为内参照，按照RNA和DNA提取试剂盒操作说明书进行总核酸提取。

4．xTAGRVP检测：

按照试剂盒说明书进行操作。可检测出甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒A型(RSVA)、呼吸道合胞病毒B型(RSVB)、冠状病毒OC43型(OC43)、冠状病毒NL63型(NL63)、冠状病毒E型(E)和冠状病毒HUK1型(HUK1)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)、副流感病毒4型(PIV4)、人类偏肺病毒(hMPV)、肠道/鼻病毒(E/RV)、腺病毒(AdV)人博卡病毒(HBoV)，其中将FluA又分为9H1N1、H1、H3和通用型，共8个种属18个型别。

5．年龄分组与季节因素：

以17～49岁为中青年组(42例)，50～88岁为中老年组(91例)。中国北方地区3～5月为春季，6～8月为夏季，9～11月为秋季，12～2月为冬季。

6．统计学方法：

采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果中计数资料以例(株)数或百分率表示，不同年龄组的差异性检验和不同季节的差异性检验选用配对设计资料的χ2检验进行分析。P0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1．呼吸道病毒感染状况：

例患者标本中，有50例检测出至少一种病毒，阳性率为37.6%；共检出病毒60株。其中27株FluA中，10株为9H1N1，2株为H3，其余为其他型；6株PIV中，1株为PIV1，5株为PIV3；4株冠状病毒(Cor)中，1株为E，1株为HUK1，2株为OC43。

2．单一感染与混合感染：

50例阳性患者中检出单一病毒感染44例(88.0%)，混合病毒感染6例(12.0%)。其中FluA、RV与PIV3共感染1例，FluB、Cor与RSV共感染1例，FluA与RSV共感染2例，FluA与RV共感染2例，FluA与AdV共感染1例。

3．呼吸道病毒感染与年龄的关系：

中青年组病毒感染阳性率显著高于中老年组(73.8%比31.9%，P0.)。

4．呼吸道病毒感染与季节性分布关系：

医院住院患者呼吸道病毒感染主要是在冬、春两季。冬季病毒阳性率最高，其次是春季，夏季最低，但是不同季节呼吸道病毒阳性检出率差异无统计学意义(χ2＝32.96，P＝0.)。

三、讨论

近年来由于免疫抑制药物广泛应用，病毒性肺炎的发病率逐渐增多，而严重急性呼吸道综合征(SARS)的流行使得病毒性肺炎诊断显得尤为重要[5]。目前对病毒性肺炎的病原学研究主要是集中在儿童方面，对于成人住院患者研究还比较少[6,7]。xTAGRVP技术基于LuminexxMAP技术平台，在单个反应体系中鉴定所有主要的常见呼吸道病毒，在美国、加拿大和欧洲已获批准用于体外诊断。本研究利用xTAGRVP方法对医院疑似病毒性肺炎患者感染的呼吸道病毒分布进行了研究，发现有37.6%的病例中至少存在一种病毒，阳性标本中混合感染占12.0%，高于Drews等[8]的研究结果，并且检测出3例三重病毒感染，这得益于xTAGRVP技术的使用。

目前很多临床医生对成人病毒性肺炎诊断不够重视，误认为除甲型流感病毒外的呼吸道病毒只可能引起上呼吸道感染，盲目使用抗生素，结果一方面导致抗生素耐药细菌的产生，另一方面贻误了病情。我们的研究将疑似病毒性肺炎的患者纳入组，尽可能排除细菌性，真菌性和非典型病原体肺炎，利用可以同时检测18种呼吸道病毒的xTAGRVP试剂敏感性和特异性高的优势，从呼吸道病毒的种类，人群分布及季节分布进行分析，因此我们的研究结果可给临床提供有效的病原学资料，为病毒性肺炎的预防和诊治提供合理依据。参考文献:(略)

本文编辑：宋国营

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